Ποσοτική ανάλυση οιστρογόνων σε γυναίκες και θηλυκά άτομα αρουραίων μέσω των χρωματογραφικών μεθόδων GC-MS/MS και της HPLC-MS/MS (Bachelor thesis)
Ιορδανίδης, Γεώργιος
Full metadata record
| DC Field | Value | Language |
|---|---|---|
| dc.contributor.author | Ιορδανίδης, Γεώργιος | el |
| dc.date.accessioned | 2020-12-04T11:43:53Z | - |
| dc.date.available | 2020-12-04T11:43:53Z | - |
| dc.identifier.uri | http://195.251.240.227/jspui/handle/123456789/12648 | - |
| dc.description | Πτυχιακή εργασία –Σχολή Γεωπόνων και Τεχνολογίας Τροφίμων και Διατροφής-Τμήμα Τεχνολογίας Τροφίμων | el |
| dc.rights | Default License | - |
| dc.subject | Οιστρογόνο | el |
| dc.subject | Ορμονικοί παράγοντες | el |
| dc.title | Ποσοτική ανάλυση οιστρογόνων σε γυναίκες και θηλυκά άτομα αρουραίων μέσω των χρωματογραφικών μεθόδων GC-MS/MS και της HPLC-MS/MS | el |
| heal.type | bachelorThesis | - |
| heal.type.en | Bachelor thesis | en |
| heal.generalDescription | Πτυχιακή εργασία | el |
| heal.classification | Οιστρογόνα | el |
| heal.classification | Estrogen | en |
| heal.identifier.secondary | 7931 | - |
| heal.language | el | - |
| heal.access | account | - |
| heal.recordProvider | Σχολή Γεωπόνων και Τεχνολογίας Τροφίμων και Διατροφής-Τμήμα Τεχνολογίας Τροφίμων | el |
| heal.publicationDate | 2016-10-05 | - |
| heal.bibliographicCitation | Ιορδανίδης,Γ.(2016).Ποσοτική ανάλυση οιστρογόνων σε γυναίκες και θηλυκά άτομα αρουραίων μέσω των χρωματογραφικών μεθόδων GC-MS/MS και της HPLC-MS/MS(Πτυχιακή εργασία).Αλεξάνδρειο ΤΕΙ Θεσσαλονίκης. | el |
| heal.abstract | Στην παρούσα μελέτη προσδιορίστηκε το ποσοστό λίπους και οι συγκεντρώσεις των ενδογενών οιστρογόγων της οιστρόνης (E1) και οιστραδιόλης (E2) σε γυναικείο λιπώδη και αδενικό μαστικό ιστό από δείγματα τριών ατόμων. Παράλληλα, μελετήθηκαν οι αντίστοιχες συγκεντρώσεις σε γυναικείο πλάσμα και πλάσμα από θηλυκούς αρουραίους. Πιο συσκεκριμένα, έγινε προσθήκη ποσοτήτων οιστρογόνων στα γυναικεία και στα δείγματα θηλυκών αρουραίων, ομογενοποίηση τους, χρήση της στήλης εκχύλισης στερεάς φάσης, παραγωγοποίηση των δειγμάτων μαστικού ιστού και διαλυτοποίηση με μίγμα ακετυλονιτριλίου:νερού των δειγμάτων πλάσματος πριν υποβληθούν σε ανάλυση χρησιμοπoιώντας την μέθοδο GC-MS/MS. Τα αποτελέσματα των ανθρώπινων ιστών παρουσίασαν ενδιαφέρον, διότι οι ανακτήσεις για την μεσαία και μεγάλη συγκέντρωση οιστρογόνων (Ε1=1000fmol/g & 10000fmol/g, ενώ Ε2=500fmol/g & 3000fmol/g) που χρησιμοποιήθηκαν έδωσαν ικανοποιητικές τιμές, σε αντίθεση με την μικρή συγκέντρωση(Ε1=100 fmol/g & Ε2=75 fmol/g). Στα δείγματα του γυναικείου πλάσματος και οι τρείς συγκεντρώσεις που χρησιμοποιήθηκαν (Ε1=35fmol/ml & 100fmol/ml & 800fmol/ml, ενώ Ε2=15fmol/ml & 125fmol/ml & 800fmol/ml) έδωσαν εξίσου καλά αποτελέσματα με αποδεκτές ανακτήσεις (±20%) για σχεδόν όλες τις συγκεντρώσεις που χρησιμοποιήθηκαν. Στα αντίστοιχα δείγματα πλάσματος αρουραίων, με μονάχα μία χρησιμοποιούμενη συγκέντρωση (Ε1=Ε2=35fmol/ml), το πείραμα εκτελέστηκε σε αυτήν την περίπτωση δύο φορές ώστε να βρεθούν αποδεκτές ανακτήσεις, λόγω των μη αποδεκτών αποτελεσμάτων που βρέθηκαν. Επίσης, εξετάστηκε κατά πόσο ενισχύεται η απόδοση των συζυγών οιστρογόνων χρησιμοποιώντας την στήλη εκχύλισης στερεάς φάσης. Χρησιμοποιήθηκαν συζυγή οιστρογόνα τα οποία υποβλήθηκαν σε εκχύλιση μέσω της παραπάνω στήλης πριν γίνει ανάλυση χρησιμοποιώντας την μέθοδο HPLC-MS/MS. Σύμφωνα με τα αποτελέσματα, παρατηρήθηκε πώς η χρήση της παραπάνω στήλης αυξάνει την ευαισθησία της ανάλυσης συντελώντας στην εύρεση ακριβέστερων αποτελεσμάτων. Παράλληλα, μελετήθηκε η αποτελεσματικότητα της στήλης διήθησης (PHREE) για την απομάκρυνση των επιδράσεων του υποστρώματος στα δείγματα πλάσματος. Σε αυτήν την περίπτωση χρησιμοποιήθηκε δύο φορές γυναικείο πλάσμα και μία μόνο συζυγή οιστρογόνα. Όπως τα δείγματα πλάσματος έτσι και τα συζυγή οιστρογόνα υποβλήθηκαν σε εκχύλιση μέσω της στήλης διήθησης (PHREE) πριν γίνει ανάλυση χρησιμοποιώντας την μέθοδο HPLC-MS/MS. Τα αποτελέσματα έδειξαν πως η χρήση της στήλης διήθησης (PHREE) δεν ήταν αποτελεσματική για την απομάκρυνση των παρεμβολών που προκύπτουν μετά την εφαρμογή της σε υπόστρωμα πλάσματος, ενώ παρατηρήθηκε ολοκληρωτική απώλεια των ποσοτήτων εμβολιασμού, όταν εφαρμόστηκε στα συζυγή οιστρογόνα. Στη συνέχεια, έλαβε χώρα εξωτερική βαθμονόμηση για την ποσοτική ανάλυση της οιστρόνης-γλυκουρονιδίου και της θεϊικης οιστραδιόλης. Χρησιμοποιήθηκαν τα παραπάνω συζυγή οιστρογόνα και έγινε διάλυση τους με μίγμα ακετυλονιτριλίου:νερού πριν υποβληθούν σε ανάλυση χρησιμοποιώντας την μέθοδο HPLC-MS/MS. Η ίδια διαδικασία διεξήχθη τρεις φορές. Τα συνολικά αποτελέσματα που προέκυψαν μετά την ολοκλήρωση των τριών βαθμονομήσεων έδωσαν αποδεκτή γραμμικότητα και ομοιογένεια των διακυμάνσεων μονάχα στην περίπτωση της θεϊικης οιστραδιόλης σε αντίθεση με την οιστρόνη-γλυκουρονίδιο. Τέλος, λαμβάνοντας υπόψη μονάχα την αποδεκτή βαθμονόμηση έγινε αξιολόγηση της, για το αν είναι αξιόπιστη ώστε να δώσει αποδεκτή ακρίβεια και πιστότητα, χρησιμοποιώντας δείγματα μαστικού ιστού και πλάσματος. Τα αποτελέσματα τόσο για την ακρίβεια όσο και για την πιστότητα βρέθηκαν μη αποδεκτά. | el |
| heal.abstract | This study determined the fat content and the concentrations of endogenous estrogens of estrone (Ε1) and estradiol (Ε2) in female fat and glandular breast tissue of three women. At the same time, the respective concentrations were studied in female plasma and plasma from female rats. More specifically, quantities of estrogens were imported in women and rat samples, homogenised, application of solid phase extraction column, derivatization for breast tissue samples and dissolving with a mixture of acetonitrile: water for plasma samples before subjected to analysis by means of GC-MS/MS.The results on human tissue samples gave satisfactory values with acceptable recoveries,for the middle and high estrogen concentrations (E1=1000fmol/g & 10000fmol/g, while E2=500fmol/g & 3000fmol/g) that were used, unlike the low concentration standards (E1=100fmol/g & E2=75fmol/g). In samples of female plasma three concentrations were used, E1=35fmol/ml & 100fmol/ml & 800fmol/ml, while E2=15fmol/ml & 125fmol/ml & 800fmol/ml) which gave equally good results with acceptable recoveries for approximately all concentrations that were used. The respective rat plasma samples, with only one concentration used (E1=E2=35fmol/ml), the experiment was performed in this case twice to find acceptable recoveries because of the unacceptable results that were found. Also examined whether the solid phase extraction column enhanced the performance of estrogen conjugates. Conjugated estrogens were used which were subjected to extraction by the above column before analyzed by means of HPLC-MS/MS method. According to the results, observed that the use of this column increases the sensitivity of analysis contributing to find accurate results. Moreover, the effectiveness of the filtration column was studied (PHREE) for removing the matrix effects in plasma samples. In this case female plasma was used twice and conjugated estrogen only once. As the plasma samples so and conjugated estrogens were extracted by filtration column (PHREE) before analysis by means of HPLC-MS/MS method. The results showed that the use of the filtration column (FREE) was not effective in removing interference that occur after the application of the plasma matrix, and when applied to conjugated estrogens observed complete loss of quantities which were used.Then, took place external calibration for quantitative analysis of estrone-glucuronide and estradiol-3-sulfate. The above estrogen conjugates were used and were dissolved with a mixture of acetonitrile: water before subjected to analysis by means of HPLC-MS/MS method. The same procedure was carried out three times. The overall results which obtained after completion of the three calibration gave acceptable linearity and variance of homogeneity only in case of estradiol-3-sulfate unlike estrone-glucuronide. Finally, taking into account only the acceptable calibration, assessed whether it is reliable to give acceptable accuracy and precision when using samples of breast tissue and plasma. The results both for accuracy and precision were found unacceptable. | en |
| heal.advisorName | Καραγεωργίου, Βασίλειος | el |
| heal.committeeMemberName | Μωρίκη, Αμαλία | el |
| heal.academicPublisher | Σχολή Γεωπόνων και Τεχνολογίας Τροφίμων και Διατροφής-Τμήμα Τεχνολογίας Τροφίμων | el |
| heal.academicPublisherID | teithe | - |
| heal.numberOfPages | 98 | - |
| heal.fullTextAvailability | false | - |
| heal.type.el | Προπτυχιακή/Διπλωματική εργασία | el |
| Appears in Collections: | Πτυχιακές Εργασίες | |
Files in This Item:
There are no files associated with this item.
Please use this identifier to cite or link to this item:
This item is a favorite for 0 people.
http://195.251.240.227/jspui/handle/123456789/12648
Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.
